摘 要：研究了Kunitz型大豆胰（yí）蛋白酶抑製劑(KSTI)和Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑（yì）製劑（jì）(BBTI)經超聲波處理後的（de）活性、巰基含量、遠紫外（wài）圓二色譜的變化。發現KSTI和BBTI的單一吸（xī）收負峰在200nm波長處，KSTI的[θ]200nm=-2545deg·cm2·d/mol，, 其（qí）二（èr）級結構由22.5%β折疊，16.25%β轉角和61.4%無規卷曲（qǔ）組成;BBTI的[θ]200nm= -797deg·cm2·d/mol，由52.6%β折疊和47.4%無規卷（juàn）曲（qǔ）組成。用65%振幅的（de）超聲波場處理11 min 後，KSTI 的[θ]200nm值變為-1827deg·cm2·d/mol，處理20min後，其β轉角和無規卷曲的含量分別下降至10.8%和54%，而β折疊的含量則增加至35.2%，同時有約71.5%的二硫化鍵轉變成（chéng）巰基，對胰蛋白酶的抑製活性則被鈍（dùn）化55%;而BBTI的（de）二級結構則表現穩定，65%振幅的超聲波場處理20min後，[θ]200nm值隻（zhī）改變為-700 deg·cm2·d/mol，其β折疊、無規卷曲結構以及對胰蛋白酶的抑製活性基本上不受影響，僅有5.29%的二硫鍵轉化成（chéng）巰基。超聲波可能是（shì）通過影響KSTI的二硫鍵（jiàn），使其二級結構發（fā）生（shēng）變化，從（cóng）而影響其活性。

　　關鍵詞：大豆胰蛋白酶抑製劑;超（chāo）聲波;圓二色譜 二級結（jié）構

　　大豆胰蛋白酶抑製劑是一類小分子量的蛋白質或多（duō）肽，對胰蛋白酶活性有抑製作用，攝入過量可導致人和動物患病。如老鼠胰（yí）腺腫大和增生（shēng），小雞生長（zhǎng）停止（zhǐ） [1,2]。因此胰蛋白酶抑製劑（jì）被（bèi）認為是大豆食品（pǐn）和飼料中主要的抗營養因子。加熱通常是有（yǒu）效地鈍化胰蛋白酶抑製劑（jì）的一種物理方法[3]。而用化（huà）學方（fāng）法鈍化胰蛋白酶抑製劑則包括修飾、還原（yuán）、去除或封閉胰蛋白酶（méi）抑製劑分子中某些活性基團[4～7]。近期（qī）的研究還提示茶葉中的多酚類也能夠有（yǒu）效地鈍化大豆胰蛋白酶抑製劑[8，9]。

　　Kunitz型大豆胰（yí）蛋白酶抑製劑(KSTI)和Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑製劑(BBTI)是大豆中兩種具有不（bú）同結（jié）構和特性的胰（yí）蛋白酶抑製劑，其中（zhōng）KSTI包括數種功能高度相似的（de）異（yì）構體[10]。KSTI和BBTI由於分子結構上的差異，對物理和化學致鈍作（zuò）用的抗性差別很大，BBTI除了對胰蛋白酶有較強的抑製活性外，對於熱（rè）、酸的（de）鈍化和胃蛋白酶的水解作（zuò）用都（dōu）具有（yǒu）很強的抗性。超聲波場能夠通過影響生物大分子的結構而能顯著地改變其功能，包括生物活性[11，12]。然而關於超聲波對大豆胰蛋白酶抑製劑結構及活性影響的（de）研究報（bào）道目前還較少。本實驗通過用超聲波（bō）場對KSTI和（hé）BBTI進行處理，研究（jiū）其活性與結構的變化，以揭示其活性、抗鈍化能力的（de）差異與其結構之間的關係。

　　產品型號：JP600G型超聲波提取（qǔ）/乳化（huà）機組

　　機型結構：超聲波發生器（qì）與提取罐（guàn）分體（tǐ）式

　　超聲頻率：28KHz

　　超聲峰（fēng）值功率：1000W (由原600W升級至1000W，價格（gé）不變)

　　提取罐內尺（chǐ）寸：直徑320 ×高250mm

　　提（tí）取罐容積：小於等於20L

　　攪拌電機功率：15W

　　攪拌電機轉速：10-30轉/min(可調)

　　電加熱功率：2KW

　　供電電源（yuán）：220VAC 50HZ

　　具有數顯（xiǎn）時鍾可調（diào）功能

　　具有數顯功率可調（diào）功能

　　具有數顯掃頻可調功能

　　具（jù）有數顯溫度可調功能

　　武漢嘉鵬電子有限公司專業致力於超（chāo）聲波提取/萃取、超聲波乳化、超（chāo）聲波清（qīng）洗、超聲波（bō）汙水處理、超（chāo）聲（shēng）波酒類醇化產品的研發、生產及銷售。公（gōng）司擁有多項（xiàng）技術。其中“數字式大功率多用途超聲波電源係（xì）統”獲武漢市重大科技成果獎。數字掃頻實現了用戶迫切需要的變頻要求的同時還彌補了早期雙頻或多頻技術帶來的超聲轉換效率很低的（de）弊端。此項技術經由全國各大院校的用（yòng）戶（hù）使用後反應很（hěn）好。應用於植物提取、乳化、汙水（shuǐ）處理等領域，院校包括：清華大（dà）學（xué）、北京大學、浙江大學、華中科技大學、武漢大學、華中師大（dà）、中國地質大學、武漢科技大學、上海交（jiāo）大、浙江工業大學（xué）、蘭州大學、河南農業大學、武漢化工（gōng）學院、吉林大學、四川大學、華南理（lǐ）工大學、華東理工（gōng）大學、江（jiāng）漢大學（xué）、長（zhǎng）江大學、中科院武漢植物所、昆明植物所、中科（kē）院過程所（suǒ）、中科院武漢物理所（suǒ）、武漢市（shì）藥檢所等。公司產品（pǐn）行銷全國除港、澳、台外的所有省份及直轄市。售後方麵：公司產（chǎn）品使用自主技（jì）術故性能穩定、質量很好。公司承諾（nuò）5年內免費質保（bǎo）。用戶采用超聲波需注意的事項：超聲波提取方麵：一、被提取物需粉碎到（dào）20目或（huò）更細。粉碎越細得率越高。二、選用合適（shì）的提取（qǔ）溶劑。三、根據產品（pǐn）的特性和產量合理的安排提取工藝（yì）。

　　超聲波乳化方麵：一、乳化液的配方包括乳化（huà）劑的（de）用量。二、乳化時間的選定，並不是時間長就（jiù）越好，乳化過程是分散和聚合不停（tíng）的循（xún）環的過程。按現有試驗結果（guǒ）顯（xiǎn）示10-15分鍾的乳化粒徑（jìng）可達100納米。

　　重要（yào）的是數字掃頻的選擇，此項共有16檔選擇，數值越（yuè）低則氣泡越粗、力量越大;數值越高則氣泡越細、力量（liàng）越小。不同的（de）提取或乳化物質改變數字掃頻會帶來不（bú）同的效果及效率。

　　超聲波提取天（tiān）然產物包括超聲波提取多肽、氨基酸、核酸、各種（zhǒng）酶類、單（dān）糖、寡糖、多糖、糖蛋白（bái）、樹脂、膠體物、木質素、維生素（sù）、脂肪、油脂、蠟、生物堿、揮發油、黃酮、糖苷類、苯丙素類、有機酸、酚類、醌類、甾體化合物、抗生素類（lèi）等。